仪器简介:
双光子荧光显微镜结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术,其基本原理是使用高能量锁模脉冲激光器,在高光子密度下,荧光分子可以同时吸收2个长波长的光子,从基态跃迁到两倍光子能量的激发态后,发射出一个波长较短的光子,其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。使用高数值孔径的物镜将脉冲激光的光子聚焦,物镜焦点处的光子密度是最高的,激发只发生在物镜的焦点上,所以双光子显微镜不需要共聚焦针孔,提高了荧光检测效率。
仪器参数:
1、内建二极管固态激光器,功率≥2.5W(800nm),波长调谐范围:690nm-1040nm,调谐速度:≥40 nm/s,激光脉宽:<100 fs。
2、2个四分仪光二极管,焦点固定云扫描器,扁平的光学光束分光器将激光分裂成4束独立的激光束。所有光束可以在物镜焦平面上形成固定的焦点云,可通过软件切换单光束扫描与云扫描模式。
3、电动活体载物台,xy轴电动调节,z轴通过液压手动精确调节,尺寸≥537mm(width)x450mm(depth),高度范围190mm-270mm,最大行程≥50mm(x)*50mm(y)*80mm(z),分辨率 xy: ≥0.078μm,重复精度:≥1.0μm。
4、物镜:干镜4X/0.2,水镜10X/0.3。
仪器功能应用:
用于观察细胞形态、细胞内生化成分的定量分析、光密度统计等,尤其应用于神经系统或活细胞的长时间研究和样品的深层3D显微成像(动态)。