送样时,请首先填写《质谱测试申请单》,提供下列信息:
1联系人;2联系方式;3课题组名称;4样品属性等。
质谱申请单下载(见文末下载附件)
一、蛋白样品鉴定
1. 样品量:50pmol干粉或浓度1ug/uL以上(一般测试)
100pmol干粉或浓度1ug/uL以上(MALDI串联质谱分析)
2. 盐含量:挥发性无机盐<20mM(如NH4HCO3等),请去除PBS、SDS和尿素等质谱干扰物质;如确有干扰盐分且无法自行去除,请在送样时详细说明,以便于我们做预处理。
3. 银染过程中不得使用戊二醛或甲醛作为固定剂;且保证在电泳后一周内进行切胶送样。
4. 电泳过程中或切胶过程中,请操作者戴口罩、帽子、无粉手套,以防止角蛋白污染;
5. 切胶时请使用干净的手术刀片切割或剪断的Tip头抠点,注意保持胶块的完整性。
6. 使用进口EP管装胶块,为防止胶块破碎,应加入一定体积的Milli-Q水保持胶块湿润。
7. 送样样品应在EP管上做好标记。
8. 为保证样品的质量,避免污染,对耗材要求如下:
Pipet Tips(Axygen公司)
eppendorf 管 (Axygen公司)
二、小分子生物标志物分析
1. 适用于分析各种体液及细胞代谢液的小分子代谢物,蛋白提取液应统一进行蛋白定量。确保浓度的均一性。
2. 液体样本如不能及时用于检测,应放入-80℃保存。期间所有操作均在4℃以下进行,所有样本保证只冻融一次。
3. 送样样品应在EP管上做好标记。
4. 为保证样品的质量,避免污染,对耗材要求同上。
三、LC-MS送样须知
1 样品量:200ug以上(一般表达谱分析) ,300ug以上(定量分析)
2 盐含量:挥发性无机盐<20mM(如NH4HCO3等),请使用丙酮沉淀、超滤、透析等方法,去除PBS、SDS和尿素等质谱干扰物质;如确有干扰盐分且无法自行去除,请在送样时详细说明,以便于我们做预处理。
3 样品提取过程中,请操作者戴口罩、帽子、无粉手套,以防止角蛋白污染;
4 使用进口EP管装样品,Pipet Tips(Axygen公司) eppendorf 管 (Axygen公司),样品应在EP管上做好标记。
5 为便于实验人员正确、快速地进行样品处理,请准确填写蛋白类样品的前处理信息,告知蛋白样品缓冲液成分及对应浓度,如是否含有硫脲、SDS或强离子盐等;提供肽段样品溶液的液体组分情况,如其中盐离子浓度等。
6 利用BCA、Bradford等方法进行过样品检测的,请务必附上检测结果,如样品浓度、电泳图等信息。
7 质谱室仅对申请人提供样品的数据质量负责。
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