一、蛋白质样品送样要求
1、 组织类样品送样要求
1) 组织类样品接收范围
蛋白组织类样品分为三类:a. 蛋白含量丰富,且只含有少量其它杂质,如大鼠肝脏组织、新鲜水稻叶片及人的血液等;b. 蛋白含量正常或较少,但富含其他杂质,如大米富含淀粉;c. 蛋白含量极低,富含其它杂质,如扇贝的贝壳、蛋壳和树皮等;d. 细胞器或亚细胞器,如膜蛋白等。
a类可以接收;b类请与技术人员联系,并提供相应的提取方法和参考文献;c类原则上不接收,建议客户自行提取蛋白;d类原则上不接收,客户自行提取。
2) 组织类样品送样要求请参照组织类样品送样要求表(见表1)。
表1:组织类样品送样要求表
样品类型 | 送样量 | 备注 |
新鲜动物组织干重 | ≥100mg | 富含杂质或蛋白质含量低的样品量干重≥5g,如植物的根、木质部、韧皮部组织等 |
新鲜植物组织干重 | ≥2g | |
微生物类如真菌、细菌和噬菌体 | ≥2g | |
新鲜培养细胞数(个) | ≥5×106(细胞沉淀体积 约50µl左右) | |
血液类 | 血清、血浆≥500µl;全血 ≥5ml | 解冻后血细胞会破裂,蛋白溶出来会影响分析,因此一般不建议送全血 |
唾液、羊水、脑脊液等) | ≥5ml | |
尿液 | ≥50ml | 送样品前用1000g离心5min,弃去沉淀 |
3)如果样品材料具有特殊性请备注说明,如具有很厚的荚膜、容易氧化等;如属需要富集的蛋白修饰分析样品,应加大送样量,具体要求请与科技代表联系。
4)对于病原性微生物,或具侵染性的病变组织,必须灭活后送样,并且在样品保存管或保存袋上做好清晰标记;如果样品中有毒性或腐蚀性的物质,必须事先声明。
2、 蛋白类样品送样要求
1) 蛋白、肽段、胶点和胶条等蛋白类样品送样要求,请参照蛋白类样品送样要求表(见表2)。
表2:蛋白类样品送样要求表
样品类型 服务类型 | 蛋白 | 肽段 | 胶点、胶条 | 备注 | |
蛋白全谱分析 | ≥500µg,浓度≥1µg/µl | 消化前蛋白 含量≥50µg | ___ | ||
蛋白定量分析 | ≥500µg,浓度≥1µg/µl | 消化前蛋白 含量≥50µg | |||
蛋白修饰分析 | 不富集 | ≥500µg,浓度≥1µg/µl | 富集后肽段≥1µg | ___ | |
富集不分组分 | ≥1mg | ||||
富集分10组分 | ≥10mg | ||||
蛋白胶条鉴定分析(包含单一蛋白鉴定) | ≥30µg,浓度≥1µg/µl | ≥50fmol/µl,体积≥10µl;盐含量:挥发性无机盐<20mM,不挥发无机<5mM; | 考染或银染 肉眼可见 | 银染胶不能含用戊二醛;且保证在电泳后一周内进行切胶送样 | |
蛋白胶点鉴定分析 | ≥50pmol; 盐含量:挥发性无机盐<20mM,不挥发无机<5mM; | ≥50fmol/µl,体积≥10µl;盐含量:挥发性无机盐<20mM,不挥发无机<5mM; | ≥1.5mm3; 考染或银染肉眼可见 | ||
蛋白分子量测定 | ≥5µg,蛋白纯度应>90%,浓度≥1µg/µl;盐含量:挥发性无机盐<20mM,不挥发无机<5mM; | ___ | ___ |
2) 为便于实验人员正确、快速地进行样品处理,请准确填写蛋白类样品的前处理信息,告知蛋白样品缓冲液成分及对应浓度,如是否含有硫脲、SDS或强离子盐等;提供肽段样品溶液的液体组分情况,如其中盐离子浓度等。
3) 利用BCA、Bradford等方法进行过样品检测的,请务必附上检测结果,如样品浓度、电泳图等信息。
为去除样品中影响质谱检测的杂质,我室需对蛋白样品进行还原烷基化、丙酮沉淀、缓冲液更换等处理,最终含量以我室测定为准。
3、样品运输要求:
1) 动物与植物组织用液氮速冻后干冰邮寄。
2)液体样品-20℃冷冻后,置于足够的干冰中邮寄。
3)全血样品,如果是分析血浆则加入抗凝剂,并冷冻后干冰邮寄;如果分析血清,则将血液冷冻后干冰邮寄(无需加入抗凝剂)。血浆或血清样品,直接冷冻后干冰邮寄。
4)冻干的胶或干粉可以直接邮寄;切胶后的湿胶(不用做任何处理),放在 EP 管中(不加任何缓冲液),直接邮寄或置于冰袋中(长途运输如需3-5天)邮寄。
5)样品请置于1.5 ml管中,管上注明样品名称、浓度以及制备时间,管口使用Parafilm封口。建议在运输前将所有样品管固定于50 ml带盖离心管中,再将50 ml管放在封口袋中。
6)保证运输过程中充足的干冰或冰块,并且尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。
注:
1、所有的生物实验都不排除有意外情况发生,如果在样品制备过程中出现非正常情况,我们会立即与您沟通,准备新的样品。请您保存样品的备份。
2、项目完成,数据提交给甲方后,乙方将不再保存样品,乙方也不返还甲方样品,合同规定的除外。
收费标准:
服务类型 | 收费标准 | 备注 |
蛋白全谱分析 | 6000元/样 | |
蛋白定量分析 | 6000元/样 | |
蛋白修饰分析 | 12000元/样 | 糖基化除外 |
蛋白胶点鉴定分析 | 450元/样 | |
蛋白分子量测定 | 400元/样 |